/ Enzyme & Kinetik

Spezifische Aktivität

Spezifische Enzymaktivität als Aktivität pro Proteinmasse: SA = EA / mE. Reinheitskennzahl bei der Enzymaufreinigung.

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Spezifische Aktivität berechnen

Spezifische Enzymaktivität als Aktivität pro Proteinmasse: SA = EA / mE. Reinheitskennzahl bei der Enzymaufreinigung.

Lösen für

SA = EA / mE

EA Enzymaktivität

mE Enzymmasse

Worum geht es?

Die spezifische Aktivität SA bezieht die Enzymaktivität auf die Masse des Enzymproteins und ist damit ein Maß für die Reinheit einer Enzympräparation. Während der Aufreinigung steigt SA von Stufe zu Stufe, sofern Begleitprotein abgereichert wird.

Sie wird typischerweise mit Aktivitätsassay und Proteinbestimmung (Bradford, BCA, A₂₈₀) parallel ermittelt.

Die Formel

Formel Spezifische Aktivität

SA = EA / mE

Umstellungen:
    EA = SA · mE
    mE = EA / SA

Die Variablen

Symbol	Bedeutung	Einheit	Erklärung
SA	Spezifische Aktivität	U/mg	Aktivität pro Proteinmasse.
EA	Enzymaktivität	U	Katalytische Aktivität.
mE	Enzymmasse	mg	Masse des Enzymproteins.

Minimal-Beispiel

EA = 50 U bei mE = 2 mg Protein:

Rechnung Beispiel

SA = EA / mE
   = 50 U / 2 mg
   = 25 U/mg

Praxis-Beispiele

Beispiel 1 — Reinigungstabelle

Stufe 1 (Rohextrakt): EA = 1200 U, mE = 600 mg → SA = 2 U/mg. Stufe 2 (Ionenaustauscher): EA = 900 U, mE = 60 mg → SA = 15 U/mg.

Rechnung Aufreinigung

Stufe 1: SA = 1200 / 600  =  2 U/mg
Stufe 2: SA =  900 /  60  = 15 U/mg
Reinigungsfaktor: 15 / 2 = 7,5×

Beispiel 2 — Proteinmenge aus SA

Eine Probe hat EA = 300 U bei bekannter SA = 60 U/mg:

Rechnung Proteinmenge

mE = EA / SA
   = 300 / 60
   = 5 mg

Beispiel 3 — Homogenes Enzym

Reine Lactatdehydrogenase erreicht SA ≈ 1000 U/mg. Wie viel Aktivität liefern 0,25 mg?

Rechnung LDH

EA = SA · mE
   = 1000 · 0,25
   = 250 U