/ Zellbiologie

Abbe-Auflösungslimit

Kleinster auflösbarer Abstand im Lichtmikroskop nach Abbe: d = λ / (2 · NA). Setzt die physikalische Grenze für die optische Mikroskopie.

Abbe-Auflösungslimit
01 · Eingabe

Abbe-Auflösungslimit berechnen

Kleinster auflösbarer Abstand im Lichtmikroskop nach Abbe: d = λ / (2 · NA). Setzt die physikalische Grenze für die optische Mikroskopie.

Lösen für
d = λ / (2 · NA)
nm

Worum geht es?

Ernst Abbe zeigte 1873, dass es eine physikalische Grenze gibt, wie fein ein klassisches Lichtmikroskop noch zwei Objektpunkte voneinander trennen kann. Diese Grenze hängt nur von der Wellenlänge des verwendeten Lichts und der numerischen Apertur des Objektivs ab — nicht von der Vergrößerung.

Praxis-Faustregel: Mit sichtbarem Licht (λ ≈ 500 nm) und Top-Objektiven (NA bis 1,4) liegt das Limit bei rund 180–200 nm. Strukturen darunter brauchen Elektronen-, Fluoreszenz- oder STED-Mikroskopie.

Die Formel

Formel Abbe
d = λ / (2 · NA)

Umstellungen:
    λ  = 2 · NA · d
    NA = λ / (2 · d)

Die Variablen

SymbolBedeutungEinheitErklärung
dAuflösungslimitnmKleinster trennbarer Punktabstand.
λWellenlängenmWellenlänge des verwendeten Lichts.
NANumerische AperturLichtsammelvermögen des Objektivs.

Minimal-Beispiel

Grünes Licht (λ = 550 nm), Trockenobjektiv mit NA = 0,9.

Rechnung Trockenobjektiv
d = 550 / (2 · 0,9)
  = 550 / 1,8
  ≈ 305,6 nm

Praxis-Beispiele

Beispiel 1 — Ölimmersion am Maximum

Blaues Licht (λ = 450 nm), Ölimmersionsobjektiv NA = 1,4.

Rechnung Ölimmersion
d = 450 / (2 · 1,4)
  = 450 / 2,8
  ≈ 160,7 nm

Nahe am theoretischen Limit klassischer Lichtmikroskopie.

Beispiel 2 — UV-Mikroskopie

UV-Licht (λ = 350 nm), Quarz-Objektiv NA = 1,25.

Rechnung UV
d = 350 / (2 · 1,25)
  = 350 / 2,5
  = 140 nm

Beispiel 3 — Nötige NA rückwärts

Welche NA ist nötig, um mit grünem Licht (550 nm) ein Auflösungslimit von 250 nm zu erreichen?

Rechnung NA bestimmen
NA = 550 / (2 · 250)
   = 550 / 500
   = 1,1